BOD분석을 위한 희석수 요건, 희석수 조제

​ □ 희석수의 요건

• 독성물질이 없을것
• 이용가능한 보조 영양원소들이 존재할 것
• 토양기원의 혼합 미생물이 충분한 개체군으로 존재할 것
• 온도는 20℃, pH는 7.2로 조절할 것

​ □ 희석수의 조제

 

◦ 희석수의 산소 포화과정 : 물의 온도를 20 ℃로 조절하여 솜으로 막은 유리병에 넣고 용존산소가 포화되도록충분히 기간을 두거나, 물이 완전히 채워지지 않은 병에 넣어 흔들어서 포화시키거나, 압축공기를 넣어 줌

 

◦ 용존산소를 포화시킨 증류수 1 L에 인산염완충액(phosphate buffer), 황산마그네슘용액(MgSO4), 염화칼슘용액(CaCl2) 및 염화제이철용액(FeCl3)을 1 mL씩 넣음. 이 액의 pH는 7.2임. pH가 7.2가 아닐 때에는 염산용액( 1 N ) 또는 수산화나트륨용액( 1 N )을 넣어 조절. 이 액은 20±1 ℃에서 5 일간 저장하였을 때의 용존산소의 감소는 0.2 ㎎/ℓ이하이어야 함

 

- 인산염완충액 :　인산수소이칼륨(K2HPO4) 21.75 g + 인산이수소칼륨(KH2PO4) 8.5 g + 인산수소이나트륨(12수화물)(Na2HPO4․12H2O) 44.6 g + 염화암모늄(NH4Cl) 1.7 g + 증류수 → 1L(이때 이 완충액의 pH는 7.2)

- 황산마그네슘 용액　： 황산마그네슘(7수화물)(MgSO4․7H2O) 22.5　g + 증류수 → 1 L

- 염화칼슘 용액　:　염화칼슘(CaCl2) 27.5g + 증류수 → 1 L

- 염화제이철 용액　:염화제이철(6수화물)(FeCl3․6H2O) 0.25g + 증류수 → 1 L

 

◦ 이 액은 20±1 ℃에서 5 일간 저장하였을 때의 용존산소의 감소가 0.2 ㎎/ℓ이하이어야 함. 이보다 높을 경우에는 사용하지 않음

‣ 희석수 조제시 사용하는 물은 자연수와 수돗물이 아닌 탈염수나 증류수 사용 - 자연수 : 일정한 수질확보가 어렵고, 미생물 개체군이 일정하지 않으며, 무기물 함량이 일정하지 않음 - 수돗물 : 잔류염소에 의한 독성유발 가능성이 있음

 

□ 식종희석수의 조제

 

◦ 시료중에 유기물질을 산화시킬 수 있는 미생물의 양이 충분하지 못할 때 미생물을 시료에 넣어 주기 위해 조제

◦ 필요할 경우 조제

◦ 사용할 때 조제함

◦ BOD용 희석수 1,000 mL에 대하여 하수, 하천수 또는 토양추출액을 실온에서 24～36 시간 가라앉힌 다음 상등액을 식종희석수로 사용

종류	희석수 1L에 대한 사용량
하수	5～10 mL
하천수	10～50 mL
토양 추출액	20～30 mL

 

□ 희석수(또는 식종희석수)의 적정여부 검토

 

◦ 시료를 BOD용 희석수(또는 BOD용 식종희석수)를 사용하여 희석할 때 희석수 중에 독성물질이 함유되어 있거나 구리, 납 및 아연 등의 금속이온이 함유된 시료( 또는 전처리한 시료 )는 호기성 미생물의 증식에 영향을 주어 정상적인 BOD값을 나타내지 않으므로 희석수의 적정여부 검토가 필요

 

◦ 글루코오스 및 글루타민산 각 150 ㎎씩을 취하여 물에 녹여 1,000 mL로 한 액 6 mL를 3 개의 300 mL BOD병에 넣고 BOD용 희석수(또는 BOD용 식종희석수)를 완전히 채운다음 BOD시험방법에 따라 시험할 때에 측정하여 얻은 BOD 값이 220±20 ㎎/L의 범위 안에 있어야 함

 

◦ 얻은 BOD 값의 편차가 클 때에는 BOD용 희석수(또는 BOD용 식종희석수) 및 시료에 문제점이 있으므로 시험전반에 대한 검토가 필요